瑞比克 3接种犬只后中和抗
瑞比克 3接种犬只后中和抗
  • 普通内科
  • 2013-03-21 15:58:55
  • 来源: 《宠物医师》作者:张海泉
  • 狂犬病是一种重要的人兽共患病,目前我国已将其列为二类传染病。虽然如此,由于种种原因目前我国因狂犬病而死亡的人数仍高居世界第二。

    狂犬病俗称“疯狗病”,是由狂犬病病毒引起的人兽共患中枢神经系统传染病,临床表现以恐水、畏光、吞咽困难、狂躁等为主要特征,是迄今为止人类唯一病死率高达100%的急性传染病1。而从世界范围来看,目前我国仍然是狂犬病的多发地带,近年报道因狂犬病而死的病例每年在2400人以上。而我国狂犬病高发的首要原因是传染源数量大,免疫率低,形不成免疫屏障。因此控制好该病,一方面需要加大犬猫的接种覆盖率,另一方面还需要确保接种动物产生了具有保护性的抗体2。

    为监测瑞比克TM3接种后在国内犬只的免疫状况,我们从广东地区收集了80,56只分别用瑞比克TM3和国产疫苗免疫犬的血清样本,委托军事医学科学院军事兽医研究所对其抗体水平进行检测,结果表明瑞比克TM3接种组犬在保护抗体滴度(0.5IU/ml)以上占91%,而对照组只有50%。

    1 材料

    1.1 试验组疫苗
    瑞比克TM3狂犬病灭活疫苗,美国辉瑞动物保健品公司提供,批号批号1215331A,有效期至:2011年8月5日。

    1.2 对照组疫苗
    吉林某厂生产的狂犬病弱毒活疫苗,市场采购,批号:200912281,有效期至:2010年12月13日。

    1.3 标准血清,病毒和细胞
    犬抗狂犬病标准阳性血清,由中国军事医学科学院军事兽医研究所流行病研究室制备,并由OIE狂犬并参考实验室标定;国际标准狂犬病强毒CVS-11株;幼仓鼠肾细胞系BHK-21。

    2 方法

    2.1 动物选择与分组  
    3-4月龄比格犬,以前未接种过狂犬病疫苗,但已接种过常规的联合疫苗。设试验组80只,对照组56只。每犬肌肉注射一头份狂犬疫苗。常规饲养,自由饮水。

    2.2 样品收集
    犬只接种后1个月,前肢头静脉空腹采血。常温静置1小时后,置于冰箱4℃保存2小时。4000转速离心12分钟,取血清,置冰箱内-21℃冷冻保存备检。

    2.3 狂犬病荧光抗体病毒中和试验(FAVN)

    2.3.1待检血清在56℃灭活30分钟,按照三倍等比稀释即3-1,3-2,3-3……3-12,并在微量培养板上同一稀释度设4个重复。

    2.3.2加入100TCID50的CVS-11,并从第二列开始作倍比稀释至2-6置于37℃感作1小时。

    2.3.3加入BHK-21细胞,培养48小时

    2.3.4丙酮固定后,加荧光标记抗体染色,荧光显微镜下读取结果。以100TCID50 CVS-11的复制完全被抑制(即没有一个荧光细胞)作为最终抑制效价判定结果。以0.5IU/ml作为狂犬病最低保护单位。

    3 结果

    在显微荧光镜下,记录出现荧光的细胞孔,计算出各血清样本的中和抗体效价。结果见表1.试验组80份血清样本,中和效价不低于0.5IU/ml的有73只犬,低于0.5IU/ml或无中和抗体的犬7只,中和抗体免疫保护水平阳性率为91.25%;对照组52份血清样本,中和效价低于和不低于0.5IU/ml的各有28只犬,中和抗体免疫保护水平阳性率50%。试验组和对照组平均抗体水平分别为2.50IU/ml和0.78IU/ml。

    4 讨论

    狂犬病是一种重要的人兽共患病,目前我国已将其列为二类传染病。虽然如此,由于种种原因目前我国因狂犬病而死亡的人数仍高居世界第二,而免疫覆盖率低则首当其冲2。一般说来,70%以上免疫覆盖率可防止犬群间狂犬病的相互传播。而在我国农村有些地方犬只免疫率只有10-20%,而猫几乎未接种2。目前国内动物狂犬病疫苗主要以国产的联合弱毒疫苗和进口的灭活单联苗为主。进口狂犬疫苗价格相对较高,主要在一些经济较发达的大中城市应用。而国产狂犬因本地生产且是弱毒疫苗,成本相对较低,因此市场价格相对较低,在经济欠发达的地区应用较广泛,市场覆盖率相对较高2。疫苗对疾病的预防结果取决于多种因素,除了动物和疾病本身外,还包括疫苗自身的性质和质量,如抗原含量,佐剂,传代次数等。对于狂犬病来说动物接种后其中和抗体水平是评估其防控效果的重要指标,并为大多数学者和专家采用3。2006年张菲4等对农村和城市地区的犬只抽样检测发现城市犬中和抗体免疫保护水平阳性率在46.3%,而农村犬仅为1.8%。2006年沈悦5等对上海市有证犬进行调查,发现市区平均抗体阳性率达到84.2%,农村48.8%,养殖场25.6%。因此,我国狂犬病控制既要加强犬只免疫的密度,又要提高已接种犬只免疫保护阳性率水平。本次试验检测结果显示瑞比克TM3灭活狂犬疫苗接种后达到保护性抗体浓度的犬只高达91%以上,对我国狂犬病防控可提供可靠的保证。

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